JCMS


Basic/Clinical Science
p53-Dependent Regulation of Nucleotide Excision Repair in Murine Epidermis in Vivo


Victor A. Tron,* Martin J. Trotter,* Takatoshi Ishikawa,† Vincent C. Ho‡,  and Gang Li

Abstract

Background: p53 protects the integrity of the genome by inducing programed cell death or by promoting DNA repair. We have previously shown that loss or mutation of p53 leads to reduced DNA repair in keratinocytes

Objective: The hypothesis that p53 regulates repair of ultraviolet light-induced epidermal DNA damage in vivo was tested in mice.

Methods: An immunohistochemical assay for pyrimidine dimers and 6–4 photoproducts was performed on ultraviolet-irradiated skin from p53 null (–/–) and wild type (+/+) mice. Immunostaining for photoproducts was quantified using computer-assisted imaging. The level of DNA repair was then expressed as the percentage of positive cells remaining as compared to the zero hour time point.

Results: p53+/+ mouse skin exposed to 1000 J/m² retained ' 25% of epidermal cyclobutane dimers at 48 h, whereas approximately 50% remained in p53–/– cells. Using the same UV dose, p53+/+ mice retained 20% of detectable 6–4 photoproducts by 24 h, whereas about 50% remained in epidermal cells of p53-deficient mice.

Conclusion: Using in situ labelling of UV-damaged cells, we confirm our earlier conclusion that p53 regulates DNA repair within the epidermis after exposure to UV light.

Sommaire

Antécédents: Le p53 protège l’intégrité du génome en provoquant la mort programmée des cellules ou en favorisant la réparation de l’ADN. Nous avons déjà montré que la perte ou la mutation du p53 réduit la réparation de l’ADN des kératinocytes.

Objectif: Vérifier l’hypothèse voulant que le p53 règisse la réparation de l’ADN in vivo des dommages épidermiques induits par les rayons ultraviolets sur des souris.

Méthodes: Un dosage immunohistochimique a été pratiqué sur de la peau¤irradiée par des UV¤de souris sans p53 (–/–) et de souris dotées du gène de type sauvage (+/+) pour dénombrer les dimères de pyrimidine et les photoproduits 6–4. L’immunocoloration des photoproduits a été quantifiée par imagerie assistée par ordinateur. Le taux de réparation de l’ADN a été exprimé sous forme du pourcentage de cellules positives résiduelles au nombre de cellules au temps zéro.

Résultats: La peau des souris avec p53+/+ exposée à une intensité de 1000 J/m² a conservé moins de 25% des dimères épidermiques de cyclobutane après 48 heures, alors qu¡il en restait environ 50% dans les cas de p53–/–. À dose égale, les souris avec p53 ont conservé 20% des photoproduits 6–4 détectables après 24 heures, contre environ 50% dans les cellules épidermiques des souris sans p53.

Conclusion: L’étiquetage in situ des cellules endommagées par des UV permet de confirmer la conclusion voulant que le p53 régit la réparation de l’ADN de l’épiderme après exposition aux rayons UV.


Received 3/26/98. Accepted for publication 4/21/98.

*Department of Pathology, Vancouver Hospital and Health Science Centre, University of British Columbia, Vancouver, BC, Canada; †Department of Pathology, University of Tokyo, 7-3-1 Hongo, Bunkyo-ku, Tokyo 113, Japan;  ‡Department of Medicine, Division of Dermatology, Vancouver Hospital and Health Science Centre, University of British Columbia, Vancouver, BC, Canada

Supported by the Medical Research Council of Canada.

Reprint requests: Dr. Victor Tron, Department of Pathology, Vancouver Hospital and Health Sciences Centre, 910 West 10th Avenue, Vancouver, BC, Canada V5Z 1L8

Full text available in the print edition / Pour le texte intégral veuillez consulter la version imprimée.


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