JCMS


Basic/Clinical Science
In Vitro C3 mRNA Expression in Pemphigus Vulgaris:
Complement Activation Is Increased by IL-1a and TNF-a


Claudio Feliciani,* Paola Toto,* Paolo Amerio,† and Pierluigi Amerio*

Abstract

Background: Pemphigus vulgaris (PV) is a potentially life-threatening disease, characterized immunohistologically by IgG deposits and complement activation on the surface of keratinocytes. Complement activation has been implicated in the pathogenesis with C3 deposits in about 90% of patients.

Objective: In order to further elucidate the role of complement in PV and to define which cytokines play a role in C3 mRNA expression, we performed an in vitro study in human keratinocytes.

Methods: Normal human epidermal keratinocytes (NHuK) were incubated with PV serum and C3 mRNA was measured. We previously had shown that IL-1a and TNF-a are expressed in PV in vivo and in vitro. Since cytokines are able to modulate complement activation, mRNA expression was evaluated in a similar experiment after pretreatment using antibodies against IL-1a and TNF-a.

Results: Incubation of NHuK with PV sera caused their detachment from the plates after 20-30 minutes with a complete acantholysis within 12 hours. An early C3 mRNA expression was seen after 30 minutes with a peak level after 1 hour. Blocking studies, using antibodies against human IL-1a and TNF-a in NHuK together with PV-IgG, showed reduction of in vitro induced acantholysis and inhibition of C3 mRNA expression.

Conclusions: This study supports the hypothesis that complement C3 is important in PV acantholysis and that complement activation is increased by IL-1a and TNF-a.

Sommaire

Antécédents : Le pemphigus vulgaire (PV) est une maladie parfois fatale, caractérisée sur le plan immunohistologique par des dépôts d'immunoglobine IgG et l'activation du complément à la surface des kératinocytes. L'activation du complément a été impliquée dans la pathogénèse, avec présence de dépôts de C3 dans 90 % des cas.

Objectifs : Éclaircir le rôle du complément dans le PV pour déterminer quels cytokines jouent un rôle dans l'expression de l'ARNm du C3 par une étude in vitro de kératinocytes humains.

Méthode : Incubation de kératinocytes épidermiques humains normaux (NHuK) avec sérum de PV et mesure de l'ARNm du C3. Nous avons déjà montré que l'IL-1a et le TNF-a s'expriment in vitro et in vivo dans le PV. Comme les cytokines peuvent moduler l'activation du complément, l'expression de l'ARNm a donc été évaluée au moyen d'une expérience similaire, après pré-traitement avec anticorps de l'IL-1a et du TNF-a.

Résultats : L'incubation des NHuK avec sérums de PV a provoqué le décollement des plaques au bout de 20 à 30 minutes, puis une acantholyse complète après 12 heures. L'ARNm du C3 est apparue précocement dès après 30 minutes, son expression culminant au bout d'une heure. Des études de blocage, à l'aide d'anticorps de l'IL-1a et du TNF-a humains dans les NHuK et le PV-IgG ont donné lieu à une réduction de l'acantholyse induite in vitro et à l'inhibition de l'expression de l'ARNm du C3.

Conclusions : Notre étude confirme l'hypothèse voulant que le complément C3 joue un rôle important dans l'acantholyse du PV et que l'activation du complément est accentuée par l'IL-a et le TNF-a..


Received 9/17/98. Accepted for publication 10/21/98.

*Department of Dermatology, University "G.D'Annunzio," Chieti, and †Department of Dermatology, University of Ancona, Ancona, Italy.

Part of this work has been presented in Rome at the 1997 Meeting of the European Society for Investigative Dermatology.

This work was financially supported by 60% MURST Italian funds.

Reprint requests: Dr. Claudio Feliciani, Clinica Dermatologica, Via dei Vestini, 66013 Chieti, Italy

Full text available in the print edition / Pour le texte intégral veuillez consulter la version imprimée.


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